Phree - 特長
Phenomenex社製固相抽出製品
1 つのメソッドで酸性・塩基性・中性化合物に対応します
１. 有機溶媒の分注
Phree リン脂質除去プレートのウェルに有機溶媒（血漿サンプル量の 3 ～ 4 倍）を注入します。
※有機溶媒量は最大 1.2mL です。推奨する有機溶媒は下記に掲載しています。
２. 血漿の添加
Phree リン脂質除去プレートの各ウェル内の有機溶媒に血漿 25μL ～ 400μL を直接添加します。有機溶媒と血 漿の比率は 3：1 ～ 4：1 に維持してください。
３. ボルテックス（※）
最高速で2 分間ボルテックスし、クロスコンタミが起こらないように注意します。サンプルは最大25 分間静置可能。
４. ろ過
| 遠心分離 | Phree リン脂質除去プレートをコレクションプレートの上に設置し、500 × g で5 分間、またはろ過液が回収されるまで遠心分離します。 |
|---|---|
| 吸引 | Phree リン脂質除去プレートを適切な96 ウェル用吸引マニホールドまたは前処理ロボットに設置します。 必ず96 ウェル用コレクションプレートをマニホールドの内部またはPhree リン脂質除去プレートの下に設置してください。 2 ～ 7inch Hg で最大5 分間、またはろ過液が回収されるまで吸引します。 |
| 加圧 | 加圧Phree リン脂質除去プレートをコレクションプレートの上に設置し、加圧マニホールドを使用して2 ～ 5psi で加圧します。 |
※：リキッドハンドラーまたは自動液体処理装置を併用する場合は、吸引／分注サイクルを利用することで、チップ内部（in-tip）での混合と沈殿 を促進することが可能です。これにより、完全な沈殿とろ過処理を行うことができます。チップ内部混合を行う場合、ボルテックスミキサー による撹拌は不要です。
標的化合物の高い回収率
Phree の一般的なメソッドプロトコルは、全てのリン脂質類を除去しつつ、酸性・塩基性・中性化合物の高い回収率が実現できるように開発されました。
推奨有機溶媒
| 溶媒 | 溶媒量 | 血漿量 |
|---|---|---|
| 1% ギ酸アセトニトリル溶液 | 300μL | 100μL |
| 1% ギ酸メタノール溶液 | 400μL | 100μL |